LC - Liquid culture - sporeoppløsning

Grunnleggende om Liquid Cultures/Flytende kulturer

En flytende kultur brukes til å utvikle mycelium i en flytende løsning for å inokulere substrater. Det blir som en sporespøyte, bare at sporene har utviklet seg til et nettverk(mycelium). Siden sporene alt har spiret, blir koloniseringstiden kortere og dermed er myceliekulturen bedre rustet mot en eventuell kontaminasjon.

En sporesprøyte kan bli til litersvis med flytende kulturer. Og det bevises raskt at flytende kulturer er veldig økonomiske, 1 ml sporevann fra en sprøyte kan bidra til et mye større volum av væske som kan brukes til å inokulere flere glass eller poser med substrat. Dersom den flytende inokuleringsvæsken er klonet(identisk vev fra en sopp), burde også hvert glass/pose som er inokulert vise noe identisk oppførsel som fart på vekst og modenhet.

Flytende kulturer består stort sett av sukkervariasjoner som er blandet ut til ca. 4% i vann.

Dette betyr at 4 gram sukker pr. 96 ml vann.(vann veier 1 gram pr. ml) På norshroom har flere prøvd ut forskjellige blandingsprosenter og kommet fra til en prosent på mellom 0,5-3 vil være bra. Se denne tråden på norshroom.

Noen kilder til næring/sukker er

  • Sirup(mais-, agave-,lønne- etc.)
  • Honning
  • Glukose
  • Malt
  • Dextrose

Dextrose bør helst ikke brukes alene pga. mangel på næring og da kan føre til langsommere vekst. Men gir en såpass gjenomsiktig løsning at man lett kan oppdage kontaminasjoner. Lys maltekstrakt og honning kan med hell brukes alene, men slike sukkertyper vil gi en tykkere løsning.
Men, selvfølgelig, preferanser til næring og blandingsforhold varierer.

En spiseskje lys maltekstrakt veier ca. 10.3 gram. En spiseskje dextrose veier ca. 10.1 gram.

Her er noen eksempler på blandingsforhold

  1. 1 Ss tørr maltekstrakt eller dextrose for hver 250 ml vann.

  2. 2% dextrose og 2% lys maltekstrakt.
    Dette vil bli ca. 1/2 ss med dextrose og 1/2 ss lys maltekstrakt pr. 250 ml vann.

  3. 1 teskje dextrose(eller lys maltsektrakt) til hver 75 ml vann.
    Eller
    1 1/4 teskje dextrose(eller lys maltekstrakt) på hver 100 ml vann.

  4. Tuppen av en teskje men honning pr. 250 ml med vann.

Siden blandingsforhold og næringsmedium varierer, prøv deg fram og finn ut hva som fungerer best for deg.

Framgangsmåte

  • Når man skal blande ut næringsmediumet kan vannet være litt varmt slik at næringen lettere løses opp.*For å sterilisere kan du putte næringsmediumet og glasset i en trykkoker i 15-20 min, elleri microbølgeovn slik at opløsninga koker i min. 30 sek(kok glasset i min. 15 minutter på forhånd).*La mediumet avkjøles(dersom du bruker micro, kan du godt skru fast lokket nå).
  • Når du nå skal inokulere glasset, er det veldig viktig at du gjør dette i rene omgivelser;
vask området du skal jobbe i, spray desifiserende spray i lufta, vask benker med antibac, rene klær, du skal også være ren,bruk engangshansker, rent utsyr osv. Jobb gjerne i en glove-box eller under varmluft.
Åpne lokket på glasset som skal inokuleres inni ovnen/boksen etc. og skrap forsiktig sporer ned i næringen, sprut noen milliliter sporevann ned i, eller ev ha spawn/bit av soppen oppi etter det har fått et kjapt H2O2(hydrogenperoxid)-bad.
  • Ev, rist glasset litt, merk det med dato og soppstrain etc. og sett det så på et varmt og mørkt sted.

Viktig!
Husk:

  • å lese bruksanvisning på trykkkoker _før_ du tar den i bruk
  • å ikke skru lokket på når du steriliserer glasset med næringsmedium
  • å ikke la det koke for lenge

Mer info kommer!


Siste endring utført February 06, 2006, at 12:38 PM